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Preparava inicialmente um meio de cultura onde pretendia cultivar os microorganismos
que encontrasse: caldo de carne de vaca. Ele o cozinhava, neutralizava,
filtrava duas vezes, colocava em balões de vidro que eram fechados
a fogo; depois, colocava os balões em uma estufa, com temperatura
entre 130 e 140 graus Celsius, para esterilizá-los. Observando esse
procedimento, verificava que o caldo de carne se conservava depois límpido
e transparente, sem aparecimento de microorganismos anômalos.
Lacerda colhia então o sangue de alguns beribéricos.
Eis como procedia
eu na colheita do sangue. Começava por lavar uma das extremidades
digitais do doente com sabão, ou álcool. Feito isto, comprimia-se
fortemente a polpa do dedo de modo a enturgescer os tecidos e penetrava-se
nele com um alfinete previamente passado no fogo. A gota de sangue surgindo
da picada era imediatamente aspirada por um tubo de vidro capilar, previamente
esterilisado na temperatura de 180 graus centígrados. Uma vez cheio
o tubo, obturavam-se os extremos com lacre derretido.
Enquanto se enchiam assim
numerosos tubos, algumas gotas do sangue aproveitavam-se para o exame microscópico
imediato. Recebida a gota entre duas lâminas de vidro, depois de
bem apertadas para operar-se a difusão do líquido, procedíamos
ao exame microscópico (...). Via-se claramente por entre os glóbulos
do sangue corpúsculos nimiamente pequenos, de forma esférica
ou ovoide, quase todos brilhantes, executando no líquido movimentos
de translação e de rotação assaz acentuados.
Lacerda não tinha dúvidas de que esses corpúsculos
eram vivos: seu movimento diminuída quando o líquido ia secando.
A quantidade desses corpúculos variava muito conforme os doentes
e os dias; em alguns casos os corpúsculos cresciam em uma direção,
depois se estrangulavam e formavam a aparência de diplococos.
Estas observações
por muito tempo repetidas, sobre o sangue de vários doentes de beriberi,
não nos deixaram dúvida alguma de que no sangue destes doentes
encontra-se sempre, com mais ou menos abundância, um micróbio,
cujas formas ali representadas são as dos micrococos.
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